
蛋白質(zhì)棕櫚?;揎棽环€定,往往需要通過(guò)間接的方法來(lái)檢測,常用的方法有:
細胞內標記法:通過(guò)細胞代謝標記棕櫚?;?lèi)似物,再通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)(Click chemistry)標記上探針,再進(jìn)行酶切,并使用鏈霉親和素樹(shù)脂特異性富集標記有生物素的肽段(原棕櫚?;亩危?,洗脫肽段后使用質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測。
?;锼亟粨Q法(ABE):蛋白質(zhì)棕櫚?;揎椣冉?jīng)過(guò) ABE 法被還原為游離巰基(-SH)并被標記上生物素,隨后進(jìn)行酶切,并使用鏈霉親和素樹(shù)脂特異性富集標記有生物素的肽段(原棕櫚?;亩危?,洗脫肽段后使用質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測。
以上兩種方法相互補充,大大降低假陽(yáng)性,并顯著(zhù)提高棕櫚?;鞍踪|(zhì)修飾的檢出率與覆蓋度,同時(shí)結合高分辨率質(zhì)譜檢測的方法,在準確相對定量、全蛋白質(zhì)組范圍內獲得優(yōu)越表現。

送樣要求:
| 樣本類(lèi)型 | 樣品量 |
| 新鮮動(dòng)物組織 | ≥500 mg |
| 新鮮植物組織 | ≥5 g |
| 細胞 | ≥1×10? cells/tube |
| 真菌或細菌 | ≥600 mg |
| 血清或血漿 | 450 μL |
| 蛋白溶液 | 5–10 mg |
| 體液(如尿液) | 15 mL |
| 體液(如唾液,細胞培養上清) | >15 mL |
參考文獻:
[1] S Mesquita F, Abrami L, Linder ME, Bamji SX, Dickinson BC, van der Goot FG. Mechanisms and functions of protein S-acylation. Nat Rev Mol Cell Biol. 2024;25(6):488-509.
[2] Zhang M, Zhou L, Xu Y, et al. A STAT3 palmitoylation cycle promotes TH17 differentiation and colitis. Nature. 2020;586(7829):434-439.
[3] Bu L, Zhang Z, Chen J, et al. High-fat diet promotes liver tumorigenesis via palmitoylation and activation of AKT. Gut. 2024;73(7):1156-1168.